质粒类型：毕赤酵母表达载体

表达水平：高拷贝

启动子：AOX1

克隆方法：多克隆位点，限制性内切酶

载体大小：8023 bp 

5' 测序引物及序列：5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´；

alpha-Factor-F:5´-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3´

3' 测序引物及序列：3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´

载体抗性：Ampicillin (氨苄青霉素)

筛选标记：HIS4

备注：

利用alpha分泌因子，分泌表达蛋白

pPIC9载体的详细信息如下：

• pPIC9载体大小8,023 bp，是融合表达载体。

• 载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.

• 利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。

• 在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。

• 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。

• 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)

• 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)

• 将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。

pPIC9 载体说明(点击下载)

pPIC9质粒序列.txt