质粒类型：酵母表达载体

表达水平：高拷贝

启动子：AOX1 promoter

克隆方法：多克隆位点，限制性内切酶

载体大小：8210 bp

5' 测序引物：5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´;

3' 测序引物：3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´

载体抗性：Ampicillin (氨苄青霉素)

筛选标记：HIS4

pHIL-D2载体的详细信息如下：

（1）pHIL-D2载体大小为8210bp，是一个融合表达载体。

（2）载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为EcoRI。

（3）胞内表达蛋白基因。

（4）在载体构建过程中，需要在基因上添加起始密码子ATG。

（5）毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。

（6）为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)。

（7）为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用SalI或者StuI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)。

（8）为了将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用BglII线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。

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pHIL-D2质粒序列.txt