产品货号 | 载体名称 | 出品公司 | 载体用途 | 产品价格 | 出货周期 |
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HG-VLT0553 | pCold TF / pCold-TF / pColdTF | Takara |
大肠杆菌冷激表达载体
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询价 | 现货 |
质粒类型:大肠杆菌冷激表达载体
表达水平:高
启动子:CSPA
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体大小:5769 bp
5' 测序引物及序列:pCold-TF-F1:5'-CCACTTTCAACGAGCTGATG-3';pCold-TF-F2:5'-GCGAAAGTGACTGAAAAAG-3'
3' 测序引物及序列:pCold-R:5'-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3'
载体标签:N-His, N-Trigger factor, N-HRV 3C, N-Thrombin, N-Factor Xa
载体抗性:Ampicillin (氨苄青霉素)
备注:温度诱导,冷休克蛋白表达载体
本制品是一种利用冷休克基因cspA启动子进行蛋白质表达的载体。载体上Trigger factor是大肠杆菌来源的分子伴侣基因,作为可溶性蛋白标签,可与目的蛋白质进行融合表达,提高目的蛋白质的可溶性。在cspA启动子下游插入了lac operator,可以严格调控目的基因的表达。另外,在cspA启 动子下游还依次插入了5'非编码区 (5'UTR)、翻译增强元件 (TEE)、His-Tag序列、TF序列和多克隆位点 (MCS)。在TF序列和MCS之间还插入了HRV3C Protease、Thrombin和Factor Xa的切断位点,用来消除融合蛋白质的标签。 此外,因为本制品的启动子是大肠杆菌来源的,所以大部分大肠杆菌都可以作为表达宿主使用。
用途:利用冷休克基因 (CspA) 的启动子表达目的蛋白质。
Takara的pCold TF载体是一种融合表达可溶性的标签"触发因子(Trigger Factor,TF)伴侣"的冷休克载体。"触发因子"(48KD)是原核核糖体相关的分子伴侣蛋白(48 kDa),有利于新表达的多肽的共翻译折叠。正因为它来源于大肠杆菌,保证了触发因子能够在大肠杆菌表达系统中高表达。 pCold TF载体由CSPA启动子及其下游的序列组成,其下游序列主要包括包括5'非翻译区(5'非编码区),翻译增强元件(TEE),His标签序列,多克隆位点(MCS)。Lac操纵子插入在CSPA启动子下游,以确保严格的表达调控。此外,HRV 3C蛋白酶,凝血酶,和Factor Xa识别位点位于“Trigger Factor”和多克隆位点(MCS)之间,以便表达的融合蛋白上将标签去除。 大多数大肠杆菌菌株都可以可以作为本载体的表达宿主。pCold TF载体提供冷休克诱导的方法高水平表达目的蛋白,再加上触发因子(伴侣)的表达来提高正确的蛋白质折叠,从而实现高效可溶性表达其他系统中难以对付的蛋白。