产品货号 | 载体名称 | 出品公司 | 载体用途 | 产品价格 | 出货周期 |
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HG-VXA0634 | ptfLC3(大鼠源LC3) | Addgene |
细胞自噬检测载体(双荧光)
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询价 | 现货 |
(1)此载体为红色、绿色双荧光标记的细胞自噬检测载体。
(2)细胞自噬定位基因为大鼠的LC3B基因。
(3)利用GFP-LC3质粒观察细胞中LC3的分布,由日本科学家首先构建和推广。但是随即他们又对其提出了质疑,因为GFP蛋白在酸性环境下绿色信号会减弱。因此,日本学者开发了一种双荧光的质粒,即ptfLC3,采取RFP和GFP两种荧光双标记。这种双标质粒的特点是:mRFP用于标记及追踪LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。在显微镜成像后,红绿荧光进行merge处理,merge后出现的黄色斑点(RFP+GFP)即只是自噬体,红色的斑点(mRFP)指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的看出自噬流的强弱,从而实时的监测自噬发生过程。
(4)此载体的详细构建步骤及使用方法请参见文献【Dissection of the autophagosome maturation process by a novel reporter protein, tandem fluorescent-tagged LC3】,Pubmed ID号为17534139。