产品货号

HG-C018

产品用途

用于克隆构建

出品公司

HonorGene（奥诺基因）

原核抗性

Str+

基因型

F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG

培养基

LB培养基

培养条件

37℃，有氧

质粒转化条件

42℃热激

产品简介

TOP10来源于MC1061菌株，是目前实验室最常用的感受态细胞之一，基因型与DH10B高度类似 (DH10B为galE15型，而TOP10为galU型)。TOP10生长速度快 (比DH5α快，但比Mach1-T1生长速度慢)，10小时可见克隆。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验。

使用方法

①TOP10感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5min后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀（避免用枪吸打），冰中静置25min。

②42℃水浴热激45s，迅速放回冰中并静置2min，晃动会降低转化效率。

③向离心管中加入700ul不含抗生素的无菌LB培养基，混匀后37℃、200rpm复苏60min。

④5000rpm离心1min收菌，留取100ul左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

⑤将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

产品规格

100ul/支

保存条件

-80℃