胰蛋白酶溶液(0.1%)

胰蛋白酶溶液(0.1%)

产品简介：

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶，能够继续活化更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为37℃。

Trypsin Solution(0.1%)含0.1%胰酶、无EDTA，无酚红，经过滤除菌。可以直接用于培养细胞的消化或者一些组织的消化，通常室温下1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。抗原修复有多种方法，主要方法可简要归纳为加热修复和非加热抗原修复两大类。非加热抗原修复方法包括酶消化、真空负压、酸水银等方法。目前主要是酶消化法，酶消化是以化学的方法来打断醛健进行修复抗原。

自备材料：

1、 PBS、Hanks液或无血清培养液

2、 显微镜

3、 离心机

操作步骤（仅供参考）：

1、 抗原修复

① 切片脱腊至水。

② 切片入H₂O₂甲醇溶液处理切片10min。

③ 自来水洗，蒸馏水洗。

④ PBS洗3次，每次1min。

⑤ 将玻片浸入Trypsin Solution(0.1%)，37℃孵育10~30min。

⑥ PBS洗3次，每次3min。

⑦ 按选好的免疫组化染色方法进行染色。

2、 贴壁细胞的消化

① 吸除培养液，用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

② 加入少量Trypsin Solution，略盖过细胞即可，室温放置1~2min，不同的细胞消化时间有所不同。

③ 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

④ 如果发现消化不足，则加入Trypsin Solution重新消化。

⑤ 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

3、 组织的消化

① 不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项：

1、 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。

2、 在Trypsin Solution过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。

3、 Trypsin Solution消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。

4、 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

5、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

注意:

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗。食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。